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【陽明大學】 98-B1 探討bigh3蛋白的生物功能

Written By: admin on 八月 27, 2009 104 Comments

申請學校:陽明大學

計畫編號:98-B1

計畫名稱:探討bigh3蛋白的生物功能

領域別:生科-醫學

主持人:翁芬華

系所:生科系暨基因體科學研究所

由實驗室學姐指導如何使用PCR 機器

學長指導Real-Time RT PCR 機器並說明實驗原理

bigh3是一種細胞外基質蛋白,可以由轉型生長乙形因子(transforming growth factor-b)誘導產生,研究顯示bigh3與細胞附著及細胞遷移(cell migration)有關。在過去一年的研究中,利用shRNA抑制食道癌細胞中bigh3蛋白的表現,結果在TE-9細胞株中,抑制其bigh3蛋白表現,會促進細胞遷移能力。除繼續以小鼠模式模擬食道癌細胞在生物體內的環境及行為,以觀察抑制bigh3蛋白的表現後對食道癌細胞株在小鼠體內的腫瘤生長及癌細胞轉移的影響。我們也將利用microarray檢驗bigh3的表現量受到抑制後,在食道癌細胞中其他基因的表現的改變,再以分子生物的方式研究bigh3蛋白是藉由何種分子路徑調控食道癌細胞。

唇顎裂發生的原因,仍然不甚清楚,很多基因已被報告與唇顎裂的發生有關。Van der Woude症候群(VWS)是唇顎裂一支重要的疾病,它是一個自體顯性的遺傳疾病,IRF6基因被發現是引起VWS的原因。IRF6基因敲除小鼠表現出包括顎裂在內的顱顏發育畸形,顯示IRF6會影響顎突的融合。最近相關研究發現TGFb3會透過smad的訊息傳導路徑調控βig-h3在顎突表皮細胞的表現,進而影響顎突的融合。IRF6具有一個DNA binding domain 以及Smad -interferon regulatory factor-binding domain;IRF6可能可以藉由和smad的結合而進入細胞核中,進而調控其他基因的表現。因此本計劃也將研究IRF6是否可以藉由和TGF-β3 所活化的smad 蛋白質結合而進入核中,並調控 βig-h3 蛋白的表現,進而影響上顎的發育。

Real-Time RT PCR 實驗結果,可看出哪些基因的片段被放大並被機器偵測到

細胞經過處理後,IRF6基因表現之變化。Real-Time RT- PCR結果,經過計算、統計並以長條圖表示

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