Fluorescence

螢光原位雜合技術 (Fluorescence in situ hybridization, FISH)
國立臺灣師範大學生命科學系研究助理林如愔

螢光原位雜合技術（FISH）是一種細胞遺傳學技術，可以用來檢測基因體上面特定核苷酸序列的存在，亦可藉由檢測信使RNA（mRNA）的表現量來觀測基因的表現。其基本原理如圖一所示：在小片段的DNA探針上以缺口轉化法（nick translation）標定Dig-dUTP或Biotin-dUTP，接著取一片經由福馬林（formalin）固定好的組織切片，將帶有標定的單股DNA探針與之進行雜合，完成之後使用螢光標定的Anti-Dig/Biotin抗體（antibodies linked with a fluorophor）進行檢測。此抗體會專一性結合上樣本中已經被Dig/Biotin標記引子雜合的核酸，螢光標定的抗體可在螢光顯微鏡下被觀測到螢光。