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【文化大學】 99-B1-2 重組蛋白質表現、純化與應用

Written By: admin on 五月 12, 2010 22 Comments

申請學校: 中國文化大學

計畫編號:99-B1-2

計畫名稱:重組蛋白質表現、純化與應用

領域別:物理-生科-工程

主持人:吳誌明

系所:化學工程與材料工程學系

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???????? 以酵母菌與大腸桿菌之表現系統生產蛋白質及其在生醫檢測器上的應用來培育跨領域優秀人才是本計劃的目的以及訓練、研究的主軸。在酵母菌蛋白質表現系統部份,我們利用基因工程技術分別建構一酵母菌表現醣蛋白hGM-CSF質體,經篩選得到高表現的轉殖株,並進行高密度細胞發酵培養得到高產量的重組hGM-CSF醣蛋白,利用金屬螯合親和層析法將hGM-CSF蛋白質從發酵液中回收純化,並且將其應用於以奈米碳管為基材平台的生醫檢測器上,利用Con A為受體而hGM-CSF醣蛋白為配體,進行專一性分子辨識與結合,進而產生訊號進行生醫分子之感測與檢驗。在大腸桿菌蛋白質表現系統部份,我們將攜帶有GST基因的重組質體送入大腸桿菌後,採用饋料批次進行高密度細胞發酵培養,經誘導可表現出大量的GST蛋白質並進而純化,再將純化後的GST蛋白質當做受體應用於奈米碳管檢測器,可與致癌物質(配體)進行專一性的辨識與結合進而產生訊號,藉此可發展出致癌物質的探測系統。結合了重組蛋白質的表現、純化與應用部份,受培訓指導的學生皆能學習到跨領域的知識與實作技術,培育具跨領域的優秀人才。

關鍵字:基因工程、高密度細胞發酵培養、重組蛋白質表現與純化、分子辨識與結合、奈米碳管、生醫檢測?

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本計畫以微生物為工廠表現重組蛋白質,圖為學生進行蛋白質電泳情形

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